GP78 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423842-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GP78O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GP78 (m) e o Plasmídeo Double Nickase GP78 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Amfr. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GP78 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423842-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GP78 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-423842-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Amfr codifica a GP78, uma ligase de ubiquitina E3 residente no retículo endoplasmático (RE) que atua como um componente-chave da degradação associada ao RE (ERAD), ubiquitinando proteínas mal dobradas ou em excesso para sua degradação pelo proteassoma. A GP78 coopera com enzimas E2 e fatores como p97/VCP para coordenar a retrotranslocação e a remoção de proteínas clientes do RE, sustentando assim a proteostase e limitando a sinalização de estresse do RE. Por meio de suas funções no controle de qualidade dependente de ubiquitina, a GP78 influencia vias relacionadas ao metabolismo lipídico, à homeostase mitocondrial e a respostas adaptativas ao estresse. A desregulação de ERAD e da sinalização por ubiquitina envolvendo a GP78 tem sido associada a processos relevantes para doenças, incluindo desequilíbrio metabólico e estresse proteotóxico, frequentemente estudados em neurodegeneração e biologia do câncer.
GP78 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Amfr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Amfr. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Amfr. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Amfr interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.