golgin 245 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404412-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- golgin 245O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase golgin 245 (h) e o Plasmídeo Double Nickase golgin 245 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GOLGA4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:golgin 245 Anticorpo (G-7): sc-514775
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
golgin 245 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404412-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
golgin 245 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404412-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GOLGA4 codifica a golgina 245, uma proteína da matriz do complexo de Golgi rica em hélices coiled-coil, que contribui para a organização da “fita” do Golgi e para a ancoragem de vesículas necessária para uma triagem eficiente de cargas ao longo da via secretora. A golgina 245 participa em processos de tráfego de membranas que coordenam o transporte retrógrado e anterógrado entre o Golgi e os compartimentos endossomais, apoiando a distribuição adequada de enzimas de glicosilação e a manutenção da arquitetura do Golgi. A disrupção das redes de ancoragem e tráfego do Golgi está associada a alterações na polaridade celular, sinalização de stress e defeitos no processamento de proteínas, frequentemente observados em contextos de cancro e doenças neurodegenerativas. Como marcador e regulador da dinâmica do Golgi, a golgina 245 é amplamente utilizada para investigar a organização do organelo, o transporte vesicular e vias relacionadas com a proteostase em células humanas.
golgin 245 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GOLGA4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GOLGA4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GOLGA4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GOLGA4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.