GnRH I Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401425-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GnRH IO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GnRH I (h) e o Plasmídeo Double Nickase GnRH I (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNRH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GnRH I Anticorpo (HU11B): sc-32292
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GnRH I Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401425-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GnRH I Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401425-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GNRH1 humano codifica o hormônio liberador de gonadotrofinas I (GnRH I), um neuro-hormônio decapeptídico do hipotálamo que inicia a sinalização endócrina reprodutiva ao estimular as células gonadotróficas da hipófise a secretarem o hormônio luteinizante e o hormônio folículo-estimulante. A atividade do GnRH I integra sinais neuroendócrinos que regulam o início da puberdade, a fertilidade e a fisiologia reprodutiva cíclica, conectando a dinâmica de secreção neuronal à esteroidogênese a jusante. A desregulação da expressão de GNRH1 ou da sinalização da via do GnRH está associada a distúrbios do eixo hipotálamo–hipófise–gonadal, incluindo o hipogonadismo hipogonadotrófico congênito e anormalidades no tempo de desenvolvimento puberal, e é frequentemente investigada em estudos de endocrinologia reprodutiva e desenvolvimento neuroendócrino. Como a sinalização do GnRH influencia programas transcricionais em tecidos hipofisários e gonadais, o GNRH1 também é relevante para modelagem de feedback endócrino e de redes gênicas responsivas a hormônios.
GnRH I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNRH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNRH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNRH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNRH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.