Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GM-CSFRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-419841-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GM-CSFRα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GM-CSFRα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GM-CSFRα Anticorpo (S-50): sc-456
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GM-CSFRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-419841-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Csf2ra codifica a cadeia alfa do recetor do fator estimulador de colónias de granulócitos-macrófagos (GM-CSFRα), que confere especificidade de ligação ao ligando e se associa à cadeia beta comum para iniciar a sinalização em células mieloides. Após a ligação do GM-CSF, este complexo recetor ativa as vias JAK2/STAT5, MAPK/ERK e PI3K/AKT para regular a proliferação, a sobrevivência, a diferenciação e a ativação funcional de granulócitos e macrófagos. A sinalização dependente de GM-CSFRα influencia programas de citocinas inflamatórias e a homeostase de células imunitárias inatas em tecidos hematopoiéticos. A desregulação do eixo GM-CSF está implicada em inflamação mediada pelo sistema imunitário e em disfunção mieloide, tornando o Csf2ra um alvo relevante para estudos mecanísticos em modelos de doenças inflamatórias e hematopoiéticas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GM-CSFRα (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Csf2ra em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Csf2ra, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Csf2ra na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GM-CSFRα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Csf2ra para a investigação da sinalização de GM-CSFRα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Csf2ra críticos para a função GM-CSFRα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Csf2ra para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GM-CSFRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GM-CSFRα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Csf2ra. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GM-CSFRα Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GM-CSFRα (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Csf2ra para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Csf2ra definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.