GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m2): sc-419841-KO-2

概要

Csf2raは、顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子受容体（GM-CSFRα）のα鎖をコードしており、リガンド結合の特異性を担うとともに、共通β鎖と複合体を形成して骨髄系細胞におけるシグナル伝達を開始します。GM-CSFが結合すると、この受容体複合体はJAK2/STAT5、MAPK/ERK、PI3K/AKT経路を活性化し、顆粒球およびマクロファージの増殖、生存、分化、機能的活性化を制御します。GM-CSFRα依存的なシグナルは、炎症性サイトカインのプログラムや、造血組織全体における自然免疫細胞の恒常性にも影響を与えます。GM-CSF軸の制御異常は、免疫介在性炎症や骨髄系機能不全に関与するとされており、Csf2raは炎症性疾患および造血疾患モデルにおける機序解明研究の重要な標的分子です。

GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）は、mouse細胞株におけるCsf2ra遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Csf2ra内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Csf2raのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GM-CSFRαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GM-CSFRαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Csf2ra欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GM-CSFRαの機能に不可欠なCsf2raエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Csf2raゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GM-CSFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGM-CSFRα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Csf2ra遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GM-CSFRα HDRプラスミド（m）および GM-CSFRα HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCsf2raホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCsf2ra標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。