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GluR-δ2双切口酶质粒(h) | sc-403400-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-δ2双切口酶质粒(h2) | sc-403400-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRID2 编码谷氨酸受体 delta-2(GluR-δ2)。它属于离子型谷氨酸受体家族成员,在小脑浦肯野神经元中高度富集,其主要作用更偏向于突触组织者,而非典型的配体门控离子通道。GluR-δ2 参与跨突触信号复合体,调控平行纤维–浦肯野细胞突触的形成、突触维持以及活动依赖性的可塑性,并影响与树突棘重塑和长时程抑制(LTD)相关的细胞内通路。GRID2 功能或表达的改变与小脑环路紊乱有关,并被认为与神经发育和神经退行性表型相关,这些表型常表现为运动协调受损和共济失调。因此,GRID2 常被用于研究突触发生机制、兴奋性突触的特异化以及小脑网络生理学。
GluR-δ2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GRID2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GRID2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GRID2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GRID2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。