Glucose Transporter Glut3 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400584-LAC

SLC2A3 codifica o transportador de glicose GLUT3 (Glut3), um transportador facilitador de glicose de alta afinidade que sustenta o metabolismo energético celular ao mediar a captação basal e induzida por estresse de glicose. O GLUT3 contribui para o fluxo glicolítico e conecta a disponibilidade de nutrientes a processos a jusante, incluindo respiração mitocondrial, equilíbrio redox e programas de sobrevivência celular, com papéis de destaque em contextos de alta demanda metabólica, como a função de neurônios e células imunes. A expressão alterada de SLC2A3 tem sido associada à reprogramação metabólica e a vias adaptativas à hipóxia, incluindo interações com a sinalização de HIF-1 e a utilização de nutrientes regulada por PI3K–AKT–mTOR. Assim, a atividade desregulada de GLUT3 é relevante para estudos de inflamação, neurobiologia e metabolismo de células cancerosas, nos quais o transporte de glicose pode moldar proliferação, diferenciação e respostas ao estresse.

As Partículas de Ativação Lentivirais Glucose Transporter Glut3 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SLC2A3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Glucose Transporter Glut3 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SLC2A3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Glucose Transporter Glut3. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SLC2A3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.