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GLT6D1CRISPR激活质粒(h2) | sc-415678-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
人类GLT6D1(glycosyltransferase 6 domain containing 1)编码一种推定定位于高尔基体的糖基转移酶,参与糖缀合物的生物合成与重塑,从而影响蛋白质糖基化以及细胞表面碳水化合物组成;通过对聚糖成熟过程的影响,GLT6D1有望调控依赖特定糖基化模式的分泌通路转运、细胞外基质相互作用以及受体介导的信号传导过程;在人类研究中,GLT6D1的遗传变异与表达/调控异常与牙周病易感性相关,提示其与口腔内宿主—微生物相互作用及炎症性组织重塑具有重要关联;针对GLT6D1的基因编辑与功能基因组学工具可用于探究糖基化依赖的表型变化,包括在疾病相关细胞模型中细胞黏附、免疫相关信号以及糖蛋白组学谱的改变。
GLT6D1 CRISPR激活质粒(h2)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性GLT6D1的表达。
GLT6D1 CRISPR激活质粒(h2)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的GLT6D1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于GLT6D1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性GLT6D1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的GLT6D1位点,并能够研究内源性位点上依赖于GLT6D1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在GLT6D1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟GLT6D1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。