GLI-1/GLI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400266-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GLI-1/GLI1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GLI-1/GLI1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GLI-1/GLI1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GLI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GLI-1/GLI1 Anticorpo (C-1): sc-515751
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GLI-1/GLI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLI-1/GLI1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLI1 codifica um fator de transcrição do tipo dedo de zinco que atua como o principal efetor terminal da sinalização Hedgehog, integrando sinais a montante provenientes da atividade de PTCH1/SMO para regular programas de expressão gênica que controlam proliferação, diferenciação e o padrão de formação dos tecidos. GLI-1/GLI1 modula a transcrição de alvos da via envolvidos na progressão do ciclo celular, em fenótipos semelhantes a células-tronco e em programas epitelial–mesenquimal, e também participa da regulação por feedback dentro da rede Hedgehog. A atividade desregulada de GLI1 está associada a sinalização do desenvolvimento aberrante e é frequentemente estudada em contextos de ativação oncogênica da via, nos quais contribui para a reprogramação transcricional e para a alteração da identidade celular. Como regulador nuclear que se liga ao DNA, GLI1 constitui um ponto acessível para dissecar o controle transcricional dependente de sinal e as redes gênicas a jusante em sistemas modelo humanos.
GLI-1/GLI1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GLI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GLI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GLI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GLI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.