ghrelin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-425542-LAC

O gene **Ghrl** de camundongo codifica a grelina, um hormônio peptídico produzido no estômago que sinaliza por meio do receptor secretagogo do hormônio do crescimento (GHSR) para regular o apetite, a homeostase energética, o metabolismo da glicose e respostas neuroendócrinas, incluindo a liberação de hormônio do crescimento. A grelina modula circuitos hipotalâmicos que controlam o comportamento alimentar e se integra a processos de recompensa, estresse e ritmos circadianos, conectando o estado nutricional periférico à sinalização central. Os efeitos a jusante incluem alterações na sinalização de cAMP/PKA e em programas transcricionais metabólicos mais amplos no fígado, tecido adiposo e músculo, além de funções adicionais na motilidade gastrointestinal e na inflamação. A desregulação da sinalização da grelina tem sido associada a fenótipos relacionados à obesidade e à caquexia, resistência à insulina e responsividade alterada ao estresse, tornando **Ghrl** um ponto de partida útil para estudar vias metabólicas e neuroendócrinas em modelos murinos.

As Partículas de Ativação Lentivirais ghrelin (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Ghrl numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais ghrelin (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Ghrl, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de ghrelin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Ghrl e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.