GH-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401171-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GH-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GH-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GH-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GH2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GH-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401171-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GH-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401171-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O hormônio do crescimento 2 (GH2) codifica o GH-2, uma variante placentária do hormônio do crescimento que ativa a sinalização do receptor de hormônio do crescimento para influenciar processos sistêmicos relacionados ao crescimento e a homeostase metabólica. A atividade do GH-2 está ligada à modulação das vias JAK2/STAT, MAPK/ERK e PI3K/AKT, integrando sinais endócrinos a programas transcricionais que controlam a utilização de nutrientes e a regulação do eixo do fator de crescimento semelhante à insulina (IGF). Na biologia humana, alterações na dinâmica do hormônio do crescimento placentário têm sido associadas a desregulação do crescimento materno-fetal e da adaptação metabólica, tornando o GH2 um locus relevante para estudos mecanísticos de sinalização endócrina. Como o GH2 compartilha semelhanças de sequência e sobreposição funcional com outros membros da família do hormônio do crescimento, ele também é útil para dissecar a regulação específica de parálogos e a interação com o receptor em modelos celulares.
GH-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GH2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GH2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GH2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GH2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.