Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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Gelsolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432743
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gelsolin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gelsolin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gelsolin Anticorpo (F-5): sc-514502
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gelsolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432743 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Gsn** em camundongo codifica a **gelsolina**, uma proteína ligante de actina regulada por **Ca2+** que corta, capeia e nucleia filamentos de actina para controlar a remodelação do citoesqueleto. Ao modular a dinâmica da actina, a gelsolina contribui para alterações na forma celular, motilidade, endocitose e fagocitose, e interage com redes de sinalização como a regulação por fosfoinositídeos e vias ligadas a GTPases da família Rho, que conectam sinais de membrana à reorganização da actina. Alterações na atividade e na expressão da gelsolina têm sido associadas a migração celular desregulada, respostas inflamatórias e remodelação tecidual, tornando-a um ponto útil para estudar fenótipos impulsionados pelo citoesqueleto. Em sistemas murinos, a perturbação de **Gsn** dá suporte a pesquisas mecanísticas sobre processos dependentes de actina relevantes para a biologia vascular, neurobiologia e função de células imunes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gelsolin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gsn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gsn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gsn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gelsolin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gsn para a investigação da sinalização de Gelsolin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gsn críticos para a função Gelsolin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gsn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gelsolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Gelsolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gsn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gelsolin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Gelsolin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gsn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gsn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.