GDF-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406826

Descripción general

GDF10 codifica el factor de diferenciación del crecimiento 10 (GDF-10), un ligando secretado de la superfamilia TGF-β implicado en la regulación de la diferenciación celular, el patrón tisular y la remodelación de la matriz extracelular. GDF-10 señaliza a través de receptores con actividad quinasa de serina/treonina para activar programas transcripcionales canónicos dependientes de SMAD e integrarse con la comunicación cruzada más amplia de la vía TGF-β/BMP, que modela las decisiones de destino celular y las respuestas del estroma. En la literatura, la expresión alterada de GDF10 se ha vinculado a procesos de desarrollo desregulados y a programas de remodelación aberrantes relevantes para microambientes fibróticos y asociados a tumores. In vitro, GDF-10 se estudia con frecuencia por sus efectos sobre el compromiso de linaje, la migración y el control del crecimiento dependiente del contexto en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GDF-10 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GDF10 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GDF10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GDF10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GDF-10.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GDF10 para la investigación de la señalización de GDF-10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GDF10 críticos para la función de GDF-10
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GDF10 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GDF-10 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GDF-10 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GDF10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GDF-10 (h) y el plásmido HDR GDF-10 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GDF10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GDF10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.