GCS-α-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404305-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCS-α-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GCS-α-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GCS-α-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GUCY1A2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCS-α-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404305-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GCS-α-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404305-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GUCY1A2 codifica a subunidade alfa-2 da guanilato ciclase solúvel (sGC), uma enzática heterodimérica contendo heme que atua como o principal receptor de óxido nítrico no citosol. Após a ligação do NO, a sGC catalisa a conversão de GTP em GMP cíclico (cGMP), propagando a sinalização por meio da ativação da PKG, da renovação do cGMP regulada por fosfodiesterases e da modulação, a jusante, do manejo de cálcio e de redes de fosforilação. Esse eixo NO–sGC–cGMP contribui para o relaxamento do músculo liso vascular, a sinalização plaquetária e uma regulação mais ampla das respostas celulares de redox e ao estresse em múltiplos tecidos. A desregulação da sinalização por cGMP tem sido implicada na fisiopatologia cardiovascular e cerebrovascular, bem como em alterações de processos inflamatórios e fibróticos, tornando o GUCY1A2 um nó relevante para estudos mecanísticos da sinalização dependente de NO.
GCS-α-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GUCY1A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GUCY1A2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GUCY1A2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GUCY1A2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.