GBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405870

Visão geral

A proteína 4 de ligação a guanilato (GBP4) é uma grande GTPase induzível por interferon que participa da imunidade intrínseca celular a jusante da sinalização de interferons do tipo I e do tipo II. A GBP4 está implicada em programas efetores da imunidade inata que modulam a restrição de patógenos, a sinalização inflamatória e as respostas antivirais, com ligações funcionais a redes transcricionais dirigidas por JAK–STAT e a vias de genes estimulados por interferon. Ao influenciar estados de ativação de células imunes e processos regulados por citocinas, a expressão e a atividade de GBP4 são frequentemente examinadas em contextos de biologia de infecções e de fisiopatologia associada ao sistema imune. Seu papel na coordenação de respostas dependentes de GTPase torna a GBP4 um nó útil para estudar a remodelação, dependente de estímulo, de programas de defesa celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GBP4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GBP4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GBP4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GBP4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GBP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GBP4 para a investigação da sinalização de GBP4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GBP4 críticos para a função GBP4
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GBP4 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GBP4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GBP4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GBP4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GBP4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GBP4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GBP4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.