Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401778
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GBP1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GBP1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GBP1 Anticorpo (1B1): sc-53857
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401778 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A proteína de ligação ao guanilato 1 (GBP1) é uma grande GTPase do tipo dinamina, induzível por interferon, que atua como efetora da imunidade inata. Ela é fortemente regulada positivamente a jusante da sinalização JAK/STAT em resposta a interferons do tipo I e do tipo II e participa da defesa célula-autônoma ao direcionar compartimentos que contêm patógenos e ao modular programas antimicrobianos e inflamatórios. A GBP1 tem sido associada a processos que incluem respostas relacionadas ao inflamassoma, tráfego intracelular e remodelamento do citoesqueleto, com funções dependentes do contexto na biologia da barreira epitelial e na ativação de células imunes. A expressão alterada de GBP1 é frequentemente observada em estados inflamatórios crônicos, em modelos de doenças infecciosas e em microambientes imunes associados a tumores, tornando-a um nó útil para o estudo de redes de genes estimulados por interferon (ISGs).
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GBP1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GBP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GBP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GBP1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GBP1 para a investigação da sinalização de GBP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GBP1 críticos para a função GBP1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GBP1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GBP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GBP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GBP1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GBP1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GBP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GBP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.