Gastrin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403220-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GastrinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Gastrin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Gastrin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GAST. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gastrin Anticorpo (B-10): sc-28302
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gastrin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403220-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Gastrin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403220-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GAST humano codifica a gastrina, uma hormona peptídica produzida predominantemente pelas células G gástricas, que regula a secreção de ácido gástrico e promove o crescimento da mucosa. Após o processamento de pré-progastrina em peptídeos de gastrina amidada bioativos, atua principalmente através do recetor CCKBR, ativando sinalização intracelular que inclui as vias PLC/PKC e MAPK/ERK, as quais coordenam a atividade secretora, a proliferação epitelial e a diferenciação. A produção ou sinalização desregulada de gastrina tem sido associada a estados de hipersecreção gástrica e é frequentemente estudada no contexto de inflamação gastrointestinal, biologia de tumores neuroendócrinos e carcinogénese gástrica e colorretal. Como um nó-chave na sinalização endócrina intestinal, o GAST é amplamente utilizado para modelar programas de secreção dependentes de estímulos e respostas transcricionais acopladas a recetores em sistemas gastrointestinais.
Gastrin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GAST em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GAST. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GAST. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GAST interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.