Gastrin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403220

Descripción general

GAST codifica la gastrina, una prohormona que se procesa en péptidos bioactivos que regulan la secreción de ácido gástrico y coordinan el crecimiento y la diferenciación de la mucosa en el tracto gastrointestinal. Al unirse al receptor de colecistoquinina B (CCKBR), la gastrina activa redes de señalización acopladas a proteína G, incluidas las vías PLC/IP3/Ca2+, PKC y MAPK/ERK, influyendo en la función secretora y la proliferación epitelial. La producción o señalización desregulada de gastrina se asocia con alteraciones de la fisiología gástrica y se ha estudiado en el contexto de la hipergastrinemia, la biología neuroendocrina gástrica y la remodelación asociada a la inflamación. Como gen del eje hormonal intestinal, GAST es un punto de entrada útil para analizar la comunicación endocrina–paracrina y los programas transcripcionales aguas abajo en sistemas modelo gástricos y pancreáticos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Gastrin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GAST en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GAST junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GAST tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Gastrin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GAST para la investigación de la señalización de Gastrin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GAST críticos para la función de Gastrin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GAST para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Gastrin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Gastrin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GAST. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Gastrin (h) y el plásmido HDR Gastrin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GAST para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GAST definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.