Gastrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403220
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gastrin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gastrin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gastrin Anticorpo (B-10): sc-28302
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gastrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403220 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GAST codifica a gastrina, uma pró-hormona processada em péptidos bioativos que regulam a secreção de ácido gástrico e coordenam o crescimento e a diferenciação da mucosa no trato gastrointestinal. Ao ligar-se ao recetor B da colecistocinina (CCKBR), a gastrina ativa redes de sinalização acopladas à proteína G, incluindo as vias PLC/IP3/Ca2+, PKC e MAPK/ERK, influenciando a função secretora e a proliferação epitelial. A produção ou a sinalização desregulada de gastrina está associada a alterações da fisiologia gástrica e tem sido estudada no contexto de hipergastrinemia, biologia neuroendócrina gástrica e remodelação associada à inflamação. Como gene do eixo hormonal intestinal, GAST é um ponto de partida útil para dissecar a comunicação endócrina–parácrina e os programas transcricionais a jusante em sistemas modelo gástricos e pancreáticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gastrin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GAST em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GAST, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GAST na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gastrin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GAST para a investigação da sinalização de Gastrin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GAST críticos para a função Gastrin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GAST para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gastrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Gastrin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GAST. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gastrin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Gastrin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GAST para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GAST definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.