GALR3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406303

Visão geral

GALR3 codifica o receptor de galanina 3, um GPCR de classe A que se liga ao neuropeptídeo galanina e a ligantes relacionados para modular a excitabilidade neuronal e a sinalização neuroendócrina. Quando ativado, o GALR3 acopla-se principalmente a proteínas G inibitórias para influenciar a atividade da adenilil ciclase, a regulação de canais iónicos e redes de sinalização a jusante ligadas a MAPK, moldando assim a libertação de neurotransmissores e circuitos responsivos ao stress. A expressão de GALR3 no sistema nervoso central e em tecidos periféricos liga-o a vias que controlam o humor, a nociceção, o comportamento alimentar e a regulação autonómica. Alterações na sinalização galanina–receptor, incluindo mudanças na expressão ou atividade de GALR3, têm sido exploradas no contexto de fenótipos neuropsiquiátricos e neurológicos e em estudos mais amplos de transdução de sinal mediada por GPCR.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GALR3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GALR3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GALR3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GALR3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GALR3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GALR3 para a investigação da sinalização de GALR3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GALR3 críticos para a função GALR3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GALR3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GALR3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GALR3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GALR3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GALR3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GALR3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GALR3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GALR3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.