GalNAc-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407682-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GalNAc-T3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GalNAc-T3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GalNAc-T3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GALNT3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GalNAc-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407682-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GalNAc-T3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407682-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GALNT3 codifica a polipeptídeo N-acetilgalactosaminiltransferase GalNAc-T3, uma enzima residente no Golgi que inicia a O-glicosilação do tipo mucina ao transferir GalNAc para resíduos de serina/treonina em proteínas secretadas e de membrana. Esta etapa inicial de glicosilação molda o dobramento, a estabilidade e o tráfego das proteínas, e modula as interações célula–célula e a sinalização de receptores por meio do remodelamento da superfície celular e da matriz extracelular. A atividade da GalNAc-T3 interage com vias que regulam a secreção, a diferenciação epitelial e o controle de qualidade de glicoproteínas, com efeitos a jusante sobre a adesão e a responsividade a fatores de crescimento. Alterações genéticas ou funcionais em GALNT3 estão associadas a desequilíbrios na homeostase do fosfato e a fenótipos de calcificação ectópica, tornando-o relevante para estudos sobre a regulação, dependente de glicosilação, da sinalização endócrina e do metabolismo mineral.
GalNAc-T3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GALNT3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GALNT3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GALNT3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GALNT3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.