GAK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404235-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GAKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GAK (h) e o Plasmídeo Double Nickase GAK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GAK. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GAK Anticorpo (D-2): sc-137053
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GAK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404235-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GAK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404235-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A quinase associada à ciclina G (GAK) é uma quinase de serina/treonina que conecta o tráfego de membrana mediado por clatrina ao controle do ciclo celular, regulando proteínas adaptadoras e a dinâmica do revestimento durante a endocitose. Em células humanas, a GAK dá suporte à internalização de receptores e à triagem endossomal, influenciando vias de sinalização como o tráfego de EGFR e respostas mitogênicas a jusante. Ela também contribui para processos associados ao Golgi e ao centrossomo ligados à progressão mitótica e à proteostase. A atividade ou expressão desregulada de GAK tem sido associada a fenótipos proliferativos e tem sido estudada no contexto de vias relacionadas à neurodegeneração envolvendo transporte vesicular e renovação/degradação de proteínas.
GAK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GAK em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GAK. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GAK. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GAK interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.