GABP-α Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417668-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABP-αO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABP-α (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABP-α (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABPA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GABP-α Anticorpo (G-1): sc-28312
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABP-α Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417668-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABP-α Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417668-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABPA codifica a proteína de ligação a GA alfa (GABP-α), um fator de transcrição de ligação ao DNA da família ETS que forma heterodímeros com subunidades GABPB para regular a atividade de promotores e enhancers. Ela integra sinais que controlam a biogênese mitocondrial e os programas de fosforilação oxidativa, incluindo genes da cadeia respiratória codificados no núcleo, e contribui para a progressão do ciclo celular e para a diferenciação por meio da coordenação de redes transcricionais. A GABP-α também participa da regulação, associada à cromatina e a promotores, de genes envolvidos em vias de resposta imune e ao estresse. A desregulação da transcrição dependente de GABPA tem sido associada a estados metabólicos alterados e a fenótipos proliferativos observados em múltiplos contextos celulares relevantes para doenças, sustentando seu uso como um nó mecanístico para a investigação de vias.
GABP-α O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABPA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABPA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABPA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABPA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.