Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GABAB R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401714-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GABAB R1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GABAB R1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GABAB R1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GABBR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GABAB R1 Anticorpo (D-2): sc-166408
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GABAB R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401714-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GABAB R1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401714-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABBR1 codifica a subunidade 1 do recetor humano GABA\_B (GABA\_B R1), um componente obrigatório de recetores acoplados à proteína G heterodiméricos que mediam a neurotransmissão inibitória lenta no sistema nervoso central. Após a ativação, a sinalização GABA\_B acopla-se a proteínas G\_i/o para inibir a adenilil ciclase, modular as vias cAMP/PKA, regular a atividade dos canais de cálcio e potássio e suprimir a libertação de neurotransmissores em locais pré- e pós-sinápticos. Esta via influencia a excitabilidade neuronal, a plasticidade sináptica e as oscilações de rede, ligando o GABBR1 a mecanismos que moldam a função dos circuitos. Alterações no tónus inibitório GABAérgico e a desregulação da sinalização do recetor GABA\_B têm sido investigadas no contexto de fenótipos neurológicos e neuropsiquiátricos, sustentando o uso de modelos de perturbação de GABBR1 para estudos mecanísticos.
GABAB R1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GABBR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GABBR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GABBR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GABBR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.