Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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G6PD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401019-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G6PDO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase G6PD (h) e o Plasmídeo Double Nickase G6PD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para G6PD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:G6PD Anticorpo (G-12): sc-373886
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
G6PD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
G6PD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O G6PD humano codifica a glicose-6-fosfato desidrogenase, a enzima limitante da via oxidativa das pentoses fosfato, que gera NADPH e ribose-5-fosfato. O NADPH sustenta a biossíntese redutiva e mantém a glutationa em estado reduzido, ligando a atividade da G6PD à homeostase redox celular e à proteção contra o estresse oxidativo. A função da G6PD influencia o fluxo metabólico, a síntese de nucleotídeos e as respostas a espécies reativas de oxigênio em eritrócitos e em muitos tipos celulares proliferativos. Variações genéticas ou atividade enzimática reduzida estão associadas à deficiência de G6PD e podem modular a suscetibilidade a dano oxidativo e a estresse hemolítico em contextos específicos, tornando a G6PD um alvo central para o estudo da biologia redox e do metabolismo.
G6PD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus G6PD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de G6PD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função G6PD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com G6PD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.