G6Pase-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420443
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- G6Pase-α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico G6Pase-α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
G6Pase-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420443 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
G6pc codifica a glicose-6-fosfatase alfa (G6Pase-α), uma enzima de membrana do retículo endoplasmático que catalisa a etapa terminal da gliconeogênese e da glicogenólise, hidrolisando a glicose-6-fosfato em glicose livre e fosfato inorgânico. No fígado, rim e epitélio intestinal de camundongos, a G6Pase-α sustenta a homeostase da glicemia em jejum e integra-se a vias que controlam o turnover do glicogênio, a produção hepática de glicose e o metabolismo de carboidratos localizado no RE. A interrupção da atividade da G6Pase-α está mecanisticamente ligada a fenótipos de armazenamento de glicogênio e de desregulação metabólica, tornando o G6pc um alvo-chave para o estudo do processamento da glicose e das respostas ao estresse hepatometabólico. Modelos de G6pc também são usados para investigar o controle transcricional e hormonal de programas gliconeogênicos e a função de enzimas de membrana do RE.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO G6Pase-α (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene G6pc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do G6pc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do G6pc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína G6Pase-α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de G6pc para a investigação da sinalização de G6Pase-α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) G6pc críticos para a função G6Pase-α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos G6pc para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo G6Pase-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo G6Pase-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus G6pc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo G6Pase-α Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR G6Pase-α (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia G6pc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo G6pc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.