G6Pase-α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420443

개요

G6pc는 포도당-6-인산분해효소 알파(G6Pase-α)를 암호화하며, 이 효소는 소포체(ER) 막에 존재하면서 포도당-6-인산을 유리 포도당과 무기 인산으로 가수분해하여 당신생(gluconeogenesis)과 글리코겐분해(glycogenolysis)의 최종 단계를 촉매합니다. 생쥐의 간, 신장 및 장 상피에서 G6Pase-α는 금식 시 혈당 항상성을 유지하고, 글리코겐 회전, 간 포도당 방출, ER에 국소화된 탄수화물 대사를 조절하는 경로들과 통합적으로 작동합니다. G6Pase-α 활성이 교란되면 기전적으로 글리코겐 저장 및 대사 조절 이상과 관련된 표현형이 나타나므로, G6pc는 포도당 처리와 간 대사 스트레스 반응을 연구하는 데 중요한 표적입니다. 또한 G6pc 모델은 당신생 프로그램의 전사적·호르몬적 조절과 ER 막 효소 기능을 규명하는 데 사용됩니다.

G6Pase-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 G6pc 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 G6pc 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 G6pc의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 G6Pase-α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 G6Pase-α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 G6pc 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• G6Pase-α 기능에 중요한 G6pc 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 G6pc 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• G6Pase-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 G6Pase-α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 G6pc 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  G6Pase-α HDR 플라스미드 (m) 및 G6Pase-α HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 G6pc 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 G6pc 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.