G3BP2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-403630-LAC

G3BP2 (fator 2 de montagem de grânulos de estresse G3BP) é uma proteína ligante de RNA que atua como um arcabouço central para a nucleação de grânulos de estresse e a triagem de mRNAs, coordenando a estabilidade dos transcritos e a tradução durante o estresse celular. Participa de redes regulatórias pós-transcricionais ligadas à sinalização por interferon, às respostas imunes inatas e à adaptação ao estresse oxidativo e do retículo endoplasmático, com impactos a jusante na progressão do ciclo celular e em vias de sobrevivência. Por meio de interações com componentes de sinalização e do metabolismo de RNA, o G3BP2 ajuda a acoplar sinais ambientais à remodelação de ribonucleoproteínas e ao controle translacional. A desregulação da dinâmica dos grânulos de estresse e da homeostase de RNA envolvendo G3BP2 tem sido associada a processos relevantes para doenças, incluindo tolerância de células tumorais ao estresse, agregação de proteínas/RNA relacionada à neurodegeneração e sinalização inflamatória.

As Partículas de Ativação Lentivirais G3BP2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de G3BP2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais G3BP2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição G3BP2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de G3BP2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo G3BP2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.