frizzled-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406690
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- frizzled-10 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico frizzled-10, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
frizzled-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406690 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FZD10 codifica a frizzled-10, um recetor de WNT com sete domínios transmembranares que regula a transdução de sinal por meio da transcrição canónica dependente de β-catenina e de vias não canónicas que controlam a polaridade planar das células e o fluxo de cálcio. Ao moldar as interações recetor–ligando na superfície celular, a frizzled-10 influencia a padronização do desenvolvimento, programas epiteliais–mesenquimais e a homeostase dos tecidos. A atividade desregulada de FZD10 e alterações na sinalização WNT/Frizzled são frequentemente estudadas no contexto de redes de sinalização oncogénica, invasão de células tumorais e estados de diferenciação aberrantes. O FZD10 também é usado como um nó da via para analisar a comunicação cruzada entre sinais de WNT e programas transcricionais responsivos a fatores de crescimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO frizzled-10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FZD10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FZD10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FZD10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína frizzled-10.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FZD10 para a investigação da sinalização de frizzled-10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FZD10 críticos para a função frizzled-10
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FZD10 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo frizzled-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo frizzled-10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FZD10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo frizzled-10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR frizzled-10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FZD10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FZD10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.