fractalkine Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422853
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- fractalkine O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico fractalkine, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
fractalkine Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422853 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cx3cl1 codifica a fractalquina (CX3CL1), uma quimiocina única, tanto ancorada à membrana quanto solúvel, que sinaliza por meio do CX3CR1 para regular a adesão, a quimiotaxia e a sobrevivência de leucócitos. Em tecidos de camundongo, a fractalquina contribui para a comunicação neuroimune ao modular as interações microglia–neurônio e ao moldar respostas inflamatórias no SNC e em órgãos periféricos. Esse eixo se integra a programas de tráfego mediados por quimiocinas e a mecanismos de adesão que influenciam o recrutamento de células mieloides, a inflamação vascular e o remodelamento tecidual. A sinalização CX3CL1–CX3CR1 desregulada é comumente estudada em contextos de neuroinflamação, patologia vascular semelhante à aterosclerose e modelos de doenças inflamatórias crônicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO fractalkine (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cx3cl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cx3cl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cx3cl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína fractalkine.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cx3cl1 para a investigação da sinalização de fractalkine, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cx3cl1 críticos para a função fractalkine
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cx3cl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo fractalkine Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo fractalkine Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cx3cl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo fractalkine Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR fractalkine (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cx3cl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cx3cl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.