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Fra1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400527-LAC | 200 µl | $455.00 |
FOSL1 编码 Fra1(Fos 样抗原 1),这是一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,可与 JUN 蛋白形成异源二聚体,组成 AP-1 复合体,从而调控对刺激依赖的基因表达程序。Fra1 整合来自 MAPK/ERK、JNK 及其他应激响应通路的信号,调节细胞周期进程、分化、迁移以及细胞外基质重塑。FOSL1 活性失调与多种组织背景下的致癌性转录网络、类似上皮–间质转化(EMT)的表型以及炎症信号改变相关。作为转录调控因子,Fra1 常被用作研究由增强子驱动的基因调控以及生长因子和细胞因子信号下游通路串扰的关键节点。
Fra1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FOSL1 表达。
Fra1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FOSL1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Fra1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FOSL1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。