FOXP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422896

Visão geral

Foxp3 codifica o FOXP3, um fator de transcrição do tipo forkhead/winged-helix que atua como regulador mestre do comprometimento de linhagem e da função supressora das células T reguladoras (Treg) em camundongos. O FOXP3 coordena programas transcricionais que controlam a tolerância imunológica, a homeostase de citocinas e os limiares de ativação de células T por meio de interações com fatores como NFAT, RUNX1 e complexos modificadores de cromatina. Em tecidos imunológicos, redes dependentes de FOXP3 moldam a tolerância periférica, limitam respostas inflamatórias e influenciam a comunicação entre células T e células apresentadoras de antígeno. A desregulação da expressão de Foxp3 ou da atividade de FOXP3 é amplamente utilizada como ponto de partida mecanístico para estudar falhas na regulação imune relevantes para modelos de autoimunidade, alergia e doenças inflamatórias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FOXP3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Foxp3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Foxp3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Foxp3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FOXP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Foxp3 para a investigação da sinalização de FOXP3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Foxp3 críticos para a função FOXP3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Foxp3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FOXP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FOXP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Foxp3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FOXP3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FOXP3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Foxp3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Foxp3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.