FOXF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420374
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FOXF2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FOXF2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FOXF2 Anticorpo (L-29): sc-101043
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FOXF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420374 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Forkhead box F2 (Foxf2) codifica o fator de transcrição FOXF2, um regulador enriquecido no mesênquima de programas gênicos do desenvolvimento que moldam o padrão tecidual, a organização da matriz extracelular e a sinalização epitélio–mesenquimal. Em camundongos, a atividade de Foxf2 contribui para a organogênese e a diferenciação do estroma ao controlar redes transcricionais a jusante de sinais morfogenéticos, incluindo vias associadas à sinalização de TGF-β/BMP, à modulação de Wnt e à remodelação do citoesqueleto/da MEC. A transcrição dependente de FOXF2 desregulada tem sido associada na literatura a alterações no comportamento de fibroblastos, arquitetura tecidual aberrante e mudanças em compartimentos estromais relacionados à barreira e ao sistema vascular, reforçando sua relevância para fenótipos de remodelamento associados a doenças. Como um nó na regulação gênica do desenvolvimento e do estroma, Foxf2 é frequentemente estudado em contextos como respostas do tipo fibrose, interações tumor–estroma e anomalias do desenvolvimento em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FOXF2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Foxf2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Foxf2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Foxf2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FOXF2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Foxf2 para a investigação da sinalização de FOXF2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Foxf2 críticos para a função FOXF2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Foxf2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FOXF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FOXF2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Foxf2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FOXF2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FOXF2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Foxf2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Foxf2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.