Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
FOXC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420370
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FOXC2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FOXC2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FOXC2 Anticorpo (G-7): sc-515234
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FOXC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420370 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Foxc2 codifica o fator de transcrição da família forkhead box FOXC2, um regulador de ligação ao DNA que coordena programas de expressão gênica responsáveis por controlar a identidade de células mesenquimais, o desenvolvimento vascular e linfático e o remodelamento do tecido adiposo em camundongos. O FOXC2 atua em redes transcricionais nucleares que se cruzam com vias de sinalização do desenvolvimento, como TGF-β e Notch, para influenciar a diferenciação endotelial, a organização da matriz extracelular e processos semelhantes à transição epitélio–mesênquima. Alterações na atividade de FOXC2 têm sido associadas à linfangiogênese desregulada, a padrões vasculares aberrantes e a mudanças em estados metabólicos e estromais comumente investigados em modelos de distúrbios do desenvolvimento e na biologia do microambiente tumoral. Essas funções tornam Foxc2 um ponto útil para dissecar o controle transcricional da morfogênese tecidual e das decisões de destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FOXC2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Foxc2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Foxc2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Foxc2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FOXC2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Foxc2 para a investigação da sinalização de FOXC2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Foxc2 críticos para a função FOXC2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Foxc2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FOXC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FOXC2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Foxc2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FOXC2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FOXC2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Foxc2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Foxc2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.