follistatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420417
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- follistatin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico follistatin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:follistatin Anticorpo (C-8): sc-365003
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
follistatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420417 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Fst de camundongo codifica a follistatina, uma glicoproteína secretada que se liga e neutraliza ligantes da superfamília TGF-β, particularmente activinas e várias BMPs, modulando assim programas transcricionais dependentes de SMAD2/3 e de SMAD1/5/8. Ao limitar a disponibilidade de ligantes, a follistatina influencia decisões de destino celular, crescimento tecidual e processos de reparo nos sistemas muscular, reprodutivo e metabólico. A atividade de Fst afeta a miogênese e o remodelamento associado à fibrose, e o desequilíbrio entre activina e follistatina é estudado em contextos de perda muscular, sinalização inflamatória e fenótipos reprodutivos. Como um regulador extracelular-chave da sinalização de fatores de crescimento, Fst constitui um ponto acessível para dissecar a comunicação cruzada entre vias e mecanismos de retroalimentação em circuitos de desenvolvimento e homeostase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO follistatin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fst em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fst, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fst na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína follistatin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fst para a investigação da sinalização de follistatin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fst críticos para a função follistatin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fst para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo follistatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo follistatin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fst. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo follistatin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR follistatin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fst para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fst definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.