Fnk CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419717

概要

マウス Plk3 は、ストレス応答性シグナル伝達および細胞周期制御に関与する Polo-like キナーゼファミリーの一員であるセリン／スレオニンキナーゼ Fnk をコードします。Fnk はチェックポイント制御に関与し、リン酸化依存的なシグナル伝達ネットワークを介して、DNA 損傷応答、アポトーシス、増殖に関連する経路を調節します。PLK3/Fnk 活性の変化は、有糸分裂の進行異常やゲノム安定性の破綻と関連づけられており、これらはがん生物学や組織恒常性の観点から重要です。こうした特性により、Plk3 は哺乳類モデル系において、キナーゼによって制御されるシグナル伝達、ストレス適応、細胞運命決定を解析するための有用な標的となります。

Fnk CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるPlk3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Plk3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Plk3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Fnkタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Fnkシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Plk3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Fnkの機能に不可欠なPlk3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Plk3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Fnk CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFnk CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Plk3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Fnk HDRプラスミド（m）および Fnk HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはPlk3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のPlk3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。