FMNL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405392-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FMNL2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FMNL2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FMNL2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FMNL2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FMNL2 Anticorpo (D-3): sc-390298
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FMNL2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405392-NIC | 20 µg | $410.00 |
FMNL2 (proteína 2 semelhante à formina) é uma formina reguladora de actina que promove o alongamento e a remodelação de filamentos para sustentar alterações na forma celular, protrusão de membrana e migração direcionada. Atua a jusante de GTPases da família Rho e integra-se a redes de sinalização do citoesqueleto que coordenam a dinâmica de adesão, a endocitose e a organização de junções célula–célula. A atividade de FMNL2 é frequentemente estudada no contexto de comportamento invasivo e remodelação tecidual, em que alterações na montagem de actina podem influenciar programas do tipo transição epitelial‑mesenquimal e características metastáticas em modelos de câncer. Além disso, o controle do citoesqueleto associado a FMNL2 é relevante para estudos de desenvolvimento e de reparo de feridas, processos que dependem de motilidade rigidamente regulada.
FMNL2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FMNL2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FMNL2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FMNL2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FMNL2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.