FLJ23356 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406964

개요

POMK(단백질 O-만노스 키나아제, protein O-mannose kinase)은 FLJ23356으로도 알려져 있으며, 세포의 골지체에 국소화된 키나아제를 암호화합니다. 이 효소는 α-디스트로글리칸의 O-만노스 인산화를 위해 필요하며, 이는 세포외기질(ECM) 결합을 지지하는 당쇄 성숙 과정에서 핵심 단계입니다. 이러한 활성은 O-만노실화 및 디스트로글리칸병(dystroglycanopathy) 관련 당화 네트워크 내에서 작동하며, 기저막(basement membrane) 조직화, 세포 부착, 근육–뇌 조직의 구조적 무결성을 조절하는 경로들과 교차합니다. POMK 의존적 당화가 교란되면 α-디스트로글리칸의 리간드 상호작용이 저해되고, 막 연관 신호전달 복합체가 교란됩니다. POMK의 유전적 결함은 디스트로글리칸병 및 선천성 근이영양증(congenital muscular dystrophy) 표현형과 연관되어 있어, 당화 연관 질환 기전을 모델링하는 데 유용한 좌위로 간주됩니다.

FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 POMK 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 POMK 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 POMK의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FLJ23356 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FLJ23356 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 POMK 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FLJ23356 기능에 중요한 POMK 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 POMK 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 POMK 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FLJ23356 HDR 플라스미드 (h) 및 FLJ23356 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 POMK 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 POMK 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.