Fgl2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420346
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Fgl2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Fgl2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fgl2 Anticorpo (4H5): sc-100276
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fgl2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420346 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Fgl2 (proteína 2 semelhante ao fibrinogênio) é uma proteína imunorreguladora associada à membrana e secretada, expressa por células endoteliais e linhagens mieloides, com funções na hemostasia e na sinalização inflamatória. Em camundongos, a Fgl2 contribui para a atividade de protrombinase que conecta a coagulação às respostas imunes inata e adaptativa, influenciando redes de citocinas e o recrutamento de leucócitos em tecidos inflamados. Sua expressão é modulada a jusante de sinais inflamatórios e tem sido estudada em contextos como modelos de hepatite viral, rejeição de transplantes e imunossupressão associada a tumores. Essas funções tornam a Fgl2 um alvo relevante para dissecar a comunicação cruzada entre vias de coagulação, a regulação de macrófagos/células T e as respostas de lesão tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Fgl2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fgl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fgl2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fgl2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Fgl2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fgl2 para a investigação da sinalização de Fgl2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fgl2 críticos para a função Fgl2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fgl2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Fgl2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Fgl2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fgl2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Fgl2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Fgl2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fgl2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fgl2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.