FGF-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403127

Visão geral

FGF8 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 8 (FGF-8), um ligante sinalizador secretado que se liga a receptores da família FGFR para regular o padrão embrionário, a morfogênese dos tecidos e decisões de destino celular. O FGF-8 ativa vias canônicas de RTKs, incluindo RAS–MAPK/ERK, PI3K–AKT e sinalização por PLCγ, influenciando programas de proliferação, migração e diferenciação de maneira dependente do contexto. A desregulação da expressão de FGF8 e da atividade da via FGFR tem sido associada a anomalias do desenvolvimento e a redes de sinalização oncogênica em múltiplos tipos tumorais, nas quais a sinalização alterada por fatores de crescimento pode remodelar programas de linhagem e interações com o microambiente. Em contextos de pesquisa, o FGF8 é comumente estudado por seus papéis na biologia do desenvolvimento, em programas transcricionais dependentes de fatores de crescimento e no crosstalk entre vias que controla a homeostase tecidual.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FGF-8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FGF8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FGF8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FGF8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FGF-8.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FGF8 para a investigação da sinalização de FGF-8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FGF8 críticos para a função FGF-8
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FGF8 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FGF-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FGF-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FGF8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FGF-8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FGF-8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FGF8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FGF8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.