FGF-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401243

Visão geral

O FGF7 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 7 (FGF-7, também conhecido como fator de crescimento de queratinócitos), um ligante parácrino produzido principalmente por células mesenquimais que sinaliza sobretudo por meio do FGFR2b em alvos epiteliais. Esse eixo de sinalização regula a proliferação, a migração e a diferenciação epiteliais e contribui para o reparo tecidual e a manutenção da barreira por meio das vias MAPK/ERK, PI3K/AKT e outras vias relacionadas a fatores de crescimento. A desregulação da sinalização FGF7–FGFR2b tem sido implicada em hiperplasia epitelial, remodelamento associado à fibrose e interações tumor–estroma que influenciam o crescimento e a invasão de carcinomas. Como um fator modelo na comunicação entre epitélio e mesênquima, o FGF-7 é frequentemente estudado em contextos como a biologia da cicatrização de feridas, a homeostase do epitélio das vias aéreas e do trato gastrointestinal e a sinalização dirigida pelo microambiente.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FGF-7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FGF7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FGF7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FGF7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FGF-7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FGF7 para a investigação da sinalização de FGF-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FGF7 críticos para a função FGF-7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FGF7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FGF-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FGF-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FGF7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FGF-7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FGF-7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FGF7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FGF7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.