FGF-19 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401725-LAC

FGF19 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 19 (FGF-19), um FGF endócrino que regula a homeostase dos ácidos biliares, o metabolismo de lipídios e o balanço energético por meio de sinalização via receptores em conjunto com o correceptor β-Klotho. Nos tecidos-alvo, o FGF-19 interage principalmente com o FGFR4 para ativar as vias a jusante MAPK/ERK e programas transcricionais relacionados, conectando a detecção de nutrientes à expressão gênica hepatobiliar e metabólica. Alterações na expressão de FGF19 ou na atividade da via de FGFR4 têm sido associadas à desregulação da síntese de ácidos biliares e à disfunção metabólica, e o gene é frequentemente estudado no contexto da biologia hepática e da sinalização mediada por fatores de crescimento. Como ligante secretado, o FGF-19 também apoia investigações mecanísticas de comunicação parácrina/endócrina e de crosstalk entre vias em modelos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais FGF-19 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de FGF19 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais FGF-19 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição FGF19, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de FGF-19. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo FGF19 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.