FGF-19 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401725-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FGF-19O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FGF-19 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FGF-19 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FGF19. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FGF-19 Anticorpo (H-12): sc-390621
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FGF-19 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401725-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
FGF-19 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401725-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FGF19 codifica o fator de crescimento de fibroblastos 19 (FGF-19), um FGF endócrino que sinaliza principalmente por meio do FGFR4 em complexo com o co-receptor β-Klotho, para regular a síntese de ácidos biliares, o metabolismo lipídico e a homeostase energética. Em hepatócitos, o FGF-19 suprime a expressão de CYP7A1 a jusante do feedback intestinal dirigido por FXR, integrando a detecção de nutrientes com programas de genes metabólicos. Esse eixo de sinalização faz interface com as vias MAPK/ERK e PI3K/AKT, influenciando a proliferação e a adaptação metabólica. A expressão ou sinalização desregulada de FGF19 tem sido associada a distúrbios metabólicos e fenótipos oncogênicos em tecidos nos quais FGFR4–β-Klotho é ativo, sustentando seu estudo na biologia hepática e em redes de sinalização relacionadas ao câncer.
FGF-19 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FGF19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FGF19. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FGF19. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FGF19 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.