fetuin-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419056
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- fetuin-A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico fetuin-A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:fetuin-A Anticorpo (H-8): sc-166531
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
fetuin-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419056 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ahsg codifica a fetuína-A, uma glicoproteína secretada, produzida pelo fígado, que circula no plasma e modula o metabolismo mineral ao se ligar ao cálcio e ao fosfato, limitando a calcificação ectópica por meio da formação de partículas calciproteicas. A fetuína-A também influencia a sinalização inflamatória e a homeostase metabólica, incluindo efeitos em vias associadas ao receptor de insulina e na ativação de macrófagos, e é frequentemente estudada no contexto de respostas sistêmicas de fase aguda. Em modelos murinos, alterações nos níveis de fetuína-A têm sido associadas à calcificação patológica, disfunção metabólica e remodelamento tecidual, tornando Ahsg um alvo útil para dissecar a comunicação cruzada entre secreção hepática, mineralização da matriz extracelular e processos da imunidade inata. Sua localização extracelular e ampla capacidade de ligação sustentam investigações sobre interações proteômicas, biologia de fatores séricos e microambientes propensos à calcificação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO fetuin-A (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ahsg em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ahsg, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ahsg na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína fetuin-A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ahsg para a investigação da sinalização de fetuin-A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ahsg críticos para a função fetuin-A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ahsg para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo fetuin-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo fetuin-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ahsg. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo fetuin-A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR fetuin-A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ahsg para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ahsg definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.