FEM1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420316
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FEM1B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FEM1B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FEM1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420316 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Fem1b codifica a FEM1B, uma proteína conservada contendo repetições de anquirina, implicada na proteostase dependente de ubiquitina e em respostas celulares ao stress. A FEM1B tem sido associada ao reconhecimento de substratos em vias de ligases de ubiquitina E3 e contribui para a regulação da apoptose e de processos associados ao ciclo celular, com efeitos a jusante na homeostase mitocondrial e na sinalização metabólica. Em sistemas murinos, a função de Fem1b tem sido estudada em contextos que incluem balanço energético, regulação endócrina e manutenção tecidular, o que a torna relevante para trabalhos mecanísticos sobre disfunção metabólica e fenótipos de adaptação ao stress. Alterações na atividade de FEM1B também foram associadas a mudanças em redes de controlo da qualidade proteica, que podem influenciar a suscetibilidade em modelos de doenças degenerativas e metabólicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FEM1B (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Fem1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Fem1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Fem1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FEM1B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Fem1b para a investigação da sinalização de FEM1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Fem1b críticos para a função FEM1B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Fem1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FEM1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo FEM1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Fem1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FEM1B Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR FEM1B (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Fem1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Fem1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.