FcRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432859

概要

Fcrl1は、B細胞に関連する免疫調節受容体であるFc receptor-like 1（FcRH1）をコードしており、抗原受容体によって駆動されるシグナル伝達と、その下流の活性化プログラムの調整に関与すると考えられています。マウスのリンパ系組織では、FcRH1の発現はB細胞の分化状態と関連し、BCR（B細胞受容体）刺激後のカルシウム流入、MAPK活性、転写応答を制御する経路と交差する近位シグナル伝達イベントの調節に結び付けられています。B細胞の活性化と生存の閾値に影響を与えることで、Fcrl1は胚中心ダイナミクス、免疫寛容、ならびに抗体応答を形作る機構の研究における機能的な手掛かりを提供します。Fc受容体様シグナル伝達ネットワークの破綻は、異常なB細胞表現型や免疫関連病態の文脈でしばしば検討されており、Fcrl1が機序免疫学研究において重要であることを支持しています。

FcRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFcrl1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fcrl1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fcrl1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FcRH1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FcRH1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fcrl1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FcRH1の機能に不可欠なFcrl1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fcrl1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FcRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFcRH1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fcrl1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FcRH1 HDRプラスミド（m）および FcRH1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFcrl1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFcrl1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。