FBXW2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406409

개요

FBXW2는 SCF(SKP1–CUL1–F-box) E3 유비퀴틴 리가아제 복합체에서 기질(표적 단백질) 인식 구성요소로 작용하는 F-box 및 WD 반복 도메인 함유 단백질을 암호화하며, 특정 단백질이 유비퀴틴화되어 프로테아좀에 의해 분해되도록 유도하는 데 기여합니다. 신호전달 및 세포주기 관련 인자들의 조절된 턴오버를 통해 FBXW2는 단백질 항상성(proteostasis)을 유지하고, 증식·분화·스트레스 반응을 제어하는 경로를 미세 조정하는 데 관여합니다. 유비퀴틴 매개 조절의 이상은 종양성 신호전달을 비롯해 단백질 항상성이 교란되는 다양한 질환에서 흔히 관찰되는 특징이므로, FBXW2는 경로 재배선의 기전을 연구하기에 중요한 노드로 간주됩니다. 따라서 FBXW2는 질환 관련 맥락에서 표적 분해 프로그램이 세포 표현형에 어떤 영향을 미치는지 조사하는 데 관심 대상입니다.

FBXW2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 FBXW2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 FBXW2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 FBXW2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 FBXW2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 FBXW2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 FBXW2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• FBXW2 기능에 중요한 FBXW2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 FBXW2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• FBXW2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 FBXW2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 FBXW2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  FBXW2 HDR 플라스미드 (h) 및 FBXW2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 FBXW2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 FBXW2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.