Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FBL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407372
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FBL4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FBL4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FBL4 Anticorpo (A-7): sc-376102
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FBL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407372 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
FBXL4 codifica uma proteína com domínio F-box e repetições ricas em leucina (FBL4) que atua como componente de reconhecimento de substrato dos complexos de ubiquitina ligase E3 do tipo SCF (SKP1–CUL1–F-box), ajudando a direcionar proteínas específicas para ubiquitinação e degradação pelo proteassoma. Por meio da degradação proteica regulada, a FBL4 contribui para programas de proteostase celular que influenciam a homeostase mitocondrial, o metabolismo energético e as respostas ao estresse. Variantes patogênicas em FBXL4 têm sido associadas a fenótipos mitocondriais encefalomiopáticos graves, caracterizados por fosforilação oxidativa comprometida e integridade da rede mitocondrial perturbada. Essas características tornam o FBXL4 um alvo relevante para investigar como vias mediadas por ubiquitina se cruzam com a biogênese mitocondrial e o controle de qualidade em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FBL4 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FBXL4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FBXL4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FBXL4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FBL4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FBXL4 para a investigação da sinalização de FBL4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FBXL4 críticos para a função FBL4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FBXL4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FBL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FBL4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FBXL4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FBL4 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FBL4 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FBXL4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FBXL4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.