Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-424024-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FatsoO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Fatso (m) e o Plasmídeo Double Nickase Fatso (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Fto. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fatso Anticorpo (C-3): sc-271713
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-424024-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Fatso Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-424024-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Fto do camundongo codifica a proteína Fatso, uma dioxigenase dependente de Fe(II)/2-oxoglutarato que atua como desmetilase de RNA, com preferência por N6-metiladenosina (m6A) e adenosinas metiladas relacionadas. Ao modular o estado de metilação do RNA, a Fatso influencia o splicing, a estabilidade, a tradução e a degradação do mRNA, moldando assim programas de expressão gênica que controlam o balanço energético e transições de estado celular. A atividade de Fto integra-se a redes de detecção de nutrientes e de sinalização metabólica, incluindo vias ligadas à adipogênese e à função mitocondrial. A expressão ou função desregulada de Fto tem sido associada a traços relacionados à obesidade e a fenótipos metabólicos, tornando-o um alvo amplamente utilizado em estudos de regulação epitranscriptômica e de mecanismos de doença impulsionados pelo metabolismo.
Fatso O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Fto em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Fto. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Fto. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Fto interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.