FAT10 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423986-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAT10O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FAT10 (m) e o Plasmídeo Double Nickase FAT10 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ubd. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAT10 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423986-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ubd de camundongo codifica a FAT10 (também conhecida como ubiquitina D), um modificador do tipo ubiquitina que é rapidamente induzido por estímulos inflamatórios e participa do direcionamento, dependente de FAT10ilação, de substratos ao proteassoma 26S. A FAT10 interage com a regulação do sistema ubiquitina–proteassoma, com a sinalização imune e com respostas ao estresse celular, influenciando a renovação de proteínas e a proteostase. Em contextos imunes e epiteliais, alterações na expressão de FAT10 têm sido associadas a mudanças no controle do ciclo celular, na sensibilidade à apoptose e na intensidade de vias inflamatórias. Essas propriedades tornam Ubd/FAT10 um nó molecular útil para estudar remodelamento tecidual associado à inflamação e desregulação de proteostase relevante para doenças em modelos murinos.
FAT10 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ubd em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ubd. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ubd. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ubd interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.