FAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420281

概要

Fas関連因子1（FAF1）は、マウスFaf1遺伝子にコードされる多機能アダプタータンパク質で、アポトーシスの制御およびタンパク質品質管理に関与しています。FAF1はデスレセプター関連シグナル伝達複合体に参加してカスパーゼ依存性経路を調節する一方、ユビキチン–プロテアソーム系の構成要素とも相互作用し、シグナル伝達タンパク質のユビキチン化や分解（ターンオーバー）に影響を与えます。これらの作用を通じて、FAF1はストレス応答と細胞運命決定を結び付け、細胞恒常性の維持に寄与します。FAF1の発現や機能の破綻はアポトーシス感受性の変化と関連しており、神経変性、免疫制御、がん関連シグナル伝達などの文脈で研究されています。

FAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFaf1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Faf1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Faf1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、FAF1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、FAF1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Faf1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• FAF1の機能に不可欠なFaf1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Faf1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• FAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびFAF1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Faf1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  FAF1 HDRプラスミド（m）および FAF1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFaf1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFaf1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。