Exportin 7CRISPR激活质粒(h): sc-405335-ACT

XPO7 编码输出蛋白 7（exportin 7），它属于 karyopherin-β 家族的核输出受体，介导 RanGTP 依赖的蛋白质货物从细胞核向细胞质的运输。输出蛋白 7 通过调控参与转录调控、应激反应以及细胞周期相关过程的因子的亚细胞定位，促进核—胞质转运与蛋白质稳态（proteostasis）的维持。核转运通路的失调会改变基因表达程序和信号传导动态，因此 XPO7 是研究“转运缺陷如何与癌症生物学及其他以核—胞质区室化异常为特征的疾病相联系”的重要节点。对 XPO7 的功能性解析有助于研究核输出选择性、与泛素-蛋白酶体及应激信号网络的通路串扰，以及增殖细胞中情境特异性的依赖关系。

Exportin 7 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性XPO7的表达。

Exportin 7 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的XPO7基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于XPO7转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Exportin 7表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的XPO7位点，并能够研究内源性位点上依赖于Exportin 7的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在XPO7表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Exportin 7通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。