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EXOSC10双切口酶质粒(h) | sc-404272-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EXOSC10双切口酶质粒(h2) | sc-404272-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EXOSC10 编码 RNA 外切体(RNA exosome)的一种在进化上高度保守的催化亚基,作为 3′–5′ 外切核糖核酸酶在细胞核与细胞质中共同参与 RNA 监视与加工过程。它参与 rRNA、snoRNA、snRNA 以及 mRNA 的成熟与周转,并通过降解异常或加工不当的 RNA 来维持转录组完整性。通过这些作用,EXOSC10 影响核糖体生物发生、核仁稳态以及 RNA 质量控制通路,而这些通路与细胞周期进程和细胞应激反应存在交叉关联。包括 EXOSC10 在内的 RNA 外切体组分发生失调,已被发现与多种疾病背景下观察到的 RNA 代谢异常相关,因此成为研究 RNA 加工缺陷机制的重要靶点。
EXOSC10 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 EXOSC10 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EXOSC10内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏EXOSC10的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了EXOSC10基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。